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荧光分光光度计工作原理及应用

发布时间:2022-04-30 16:28:38 来源:竞技宝测速网站 作者:竞技宝登陆

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  荧光分光光度计是最常见的实验仪器,主要用于对经光源激发后产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析。在检测食品安全、自然环境污染等重要的人类课题上,发挥积极的作用。荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器,有滤光片荧光计、滤光片-单色器荧光计等,通常均由以下四个部分组成:激发光源、用于选择激发光波长和荧光波长的单色器、样品池及测量荧光的检测器。

  对激发光源主要考虑其稳定性和强度,因为光源的稳定性直接影响测量的重复性和精确度,而光源的强度又直接影响测定的灵敏度。荧光测量中常用的光源包括高压汞灯或氙灯。氙灯产生强烈的连续辐射,其波长范围在250~700nm;高压汞灯发射365 nm、405 nm、436 nm、546 nm、579 nm、690nm和734 nm的线 nm三条谱线。目前大部分荧光分光光度计都采用150W和500W的氙灯作光源;现代荧光仪器有采用12 V50W的新型溴钨灯作光源,在300~700nm波段发射连续光谱。此外,20世纪70年代开始用激光作为激发光源,激光光源单色性好、光强度大、脉冲激光的光照时间短,可以避免某些感光物质的分解。

  荧光分析仪器有两个单色器,激发单色器(第一单色器)和荧光单色器(第二单色器)。第一个单色器的作用是将不需要的光除去,使需要的激发光透过而照射到样品池,第二个滤光片将由激发光所发生的反射光、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中杂质所发生大多数的荧光滤去。滤光片荧光计采用滤光片做单色器,结构简单,价格便宜,用于已知组分样品的定量分析,不能提供激发光谱或荧光光谱。荧光分光光度计都采用光栅分光,可以获得单色性好的激发光,并能分出某一波长的荧光,以减少干扰,而且可以扫描激发光谱或荧光光谱。

  荧光分析用的样品池须用低荧光材料制成,通常用石英,四面均透光。形状有正方形、长方形或圆形,但常用正方形样品池,因其散射干扰较少。

  荧光分光光度计中的检测器有较高的灵敏度,一般用光电倍增管(PMT)做检测器。为了消除激发光对荧光测量的干扰,在仪器中,检测光路与激发光路是相互垂直的。

  目前,荧光分光光度法在各个领域内得到广泛应用:诸如有机电致发光和液晶等工业材料;水质分析等环境相关领域;荧光试剂的合成与开发等制药领域;细胞内钙离子浓度测定等生物技术相关领域。苏州思普莱代理的日立荧光光度计以其高灵敏度,快速的扫描速度以及优异的性能为越来越的实验人员带来高效的科研成果,助力科研创新!返回搜狐,查看更多